2×PCR Super Mix (боёк менен)
2× PCR Master Mix Taq DNA Polymerase, dNTPs жана башка ПТР талап кылынган компоненттерди камтыйт.Master Mix биздин ылайыкташтырылган стабилизаторлорубуз менен 4℃ температурада 3 ай туруктуу.Алдын ала аралаштыруу чечими кадимки ПТР үчүн оптималдаштырылган жана ДНК үлгүсүн жана праймерлерди кошуу менен колдонууга даяр.ПЦР продуктуларын алдын ала жүктөлгөн бромофенол көк боёгу менен электрофорез үчүн түздөн-түз жүктөөгө болот.Күчөтүлгөн өнүмдөр 3 '-дА протрузияны камтыйт жана аларды Т векторуна оңой клондосо болот.2×PCR Master Mix ПТР процедурасын жеңилдетет жана булганууну азайтат.
Сактоо шарттары
Продукциялар -25℃~-15℃ температурада 2 жыл сакталышы керек.
Техникалык шарттар
| Fidelity(Vs.Taq) | 1× |
| Hot Start | No |
| Overhang | 3'-А |
| Полимераз | Так ДНК полимераза |
| Реакция форматы | SuperMix же Master Mix |
| Реакция ылдамдыгы | Стандарт |
| Продукт түрү | PCR Master Mix (2x) |
Instructions
1.Реакция системасы
| Компоненттер | Көлөм(мкл) |
| Үлгү ДНК | Ылайыктуу |
| Primer 1 (10 мкмоль/л) | 2 |
| Primer 2 (10 мкмоль/л) | 2 |
| 2× ПТР Мастер Микс | 25 |
| ddH2O | 50гө чейин |
2.Күчөтүү протоколу
| Цикл кадамдары | Температура (°C) | Убакыт | Циклдер |
| Баштапкы денатурация | 94 | 5 мүнөт | 1 |
| Денатурация | 94 | 30 сек | 35 |
| Жылуулоо | 50-60 | 30 сек | |
| Кеңейтүү | 72 | 30-60 сек/кб | |
| Акыркы узартуу | 72 | 10 мүнөт | 1 |
Эскертүү:
1) Шаблонду колдонуу: 50-200нг геномдук ДНК;0,1-10нг плазмиддик ДНК.
2) Mg2+концентрациясы: Бул продукт MgCl2 3mM камтыйт, көпчүлүк ПТР реакциялары үчүн ылайыктуу.
3) Күйүү температурасы: Праймерлердин теориялык Tm маанисин караңыз.Күйүү температурасын праймердин теориялык маанисинен 2-5℃ төмөн коюуга болот.
4) Узартуу убактысы: Молекулярдык идентификация үчүн 30 сек/кб сунушталат.Генди клондоо үчүн 60 сек/кб сунушталат.
Эскертүүлөр
1.2× ПТР Мастер Микс менен ПТР продуктулары полиакриламиддик гел электрофорез үчүн ылайыктуу эмес.
2.Сиздин коопсуздугуңуз жана ден соолугуңуз үчүн лабораториялык халаттарды жана операция үчүн бир жолу колдонулуучу кол каптарды кийиңиз.
3.Бул изилдөө үчүн гана колдонулат!
