One Step Fast RT-qPCR Probe Premix-UNG
Cat №: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) — РНКны шаблон катары колдонуу менен бир-плекстүү же мультиплекстүү сандык ПТР үчүн ылайыктуу зондго негизделген RT-qPCR тез аныктоочу комплект (мисалы, РНК вирусу).Бул продукт антитело менен модификацияланган Так ДНК Полимеразанын жаңы муунун жана бир кадамдуу атайын Кайтарма Транскриптазаны колдонот, аны тез күчөтүү үчүн оптималдаштырылган буфери бар, ал тезирээк күчөтүү ылдамдыгына, күчөтүү эффективдүүлүгүнө жана өзгөчөлүгүнө ээ.Ал кыска убакыттын ичинде аз жана жогорку концентрациялуу үлгүлөрдүн бир плексинде жана мультиплексинде тең салмактуу күчөтүүнү колдойт.
Компоненттер
1. 5×RT-qPCR буфери (U+)
2. Фермент аралашмасы (U+)
Эскертүүлөр:
а.5×RT-qPCR буфери (U+) dNTP жана Mg камтыйт2+;
б.Enzyme аралашмасы (U+) тескери транскриптаза, Hot Start Taq ДНК полимераза, RNase ингибитору жана UDG камтыйт;
в.RNase-Free учтарын, EP түтүктөрүн ж.б. колдонуңуз.
Колдонуунун алдында 5×RT-qPCR буферин (U+) кылдат аралаштырыңыз.Эриткенден кийин кандайдыр бир жаан-чачын болсо, буфердин бөлмө температурасына кайтып келишин күтүп, аралаштырып, эритип, анан аларды кадимкидей колдонуңуз.
Сактоо шарттары
продукт кургак муз менен жөнөтүлөт жана 1 жыл бою -25 ~ -15 ℃ сактоого болот.
Instructions
1. Реакция Система
| Компоненттер | Көлөмү (20 мкл реакция) |
| 2 ×RT-qPCR буфери | 4μL |
| Фермент аралашмасы (U+) | 0.8μL |
| Primer Forward | 0.1~ 1.0μM |
| Primer Reverse | 0.1~ 1.0μM |
| TaqMan Probe | 0.05~0.25μM |
| Шаблон | X мкл |
| RNase-Free Суу | 25 мкл чейин |
Эскертүү: Реакция көлөмү 10-50μL.
2. Cycling Protocol (Сстандарт)
| Цикл кадам | Темп. | Убакыт | Циклдер |
| Тескери транскрипция | 55 ℃ | 10 мүнөт | 1 |
| Баштапкы денатурация | 95 ℃ | 30 сек | 1 |
| Денатурация | 95 ℃ | 10 сек | 45 |
| Күйүү/узартуу | 60 ℃ | 30 сек |
| Cycling Protocol (Тез) Цикл кадам |
Темп. |
Убакыт |
Циклдер |
| Тескери транскрипция | 55 ℃ | 5 мүнөт | 1 |
| Баштапкы денатурация | 95 ℃ | 5 с | 1 |
| Денатурация | 95 ℃ | 3 с | 43 |
| Күйүү/узартуу | 60 ℃ | 10 с |
Эскертүүлөр:
а.Тескери транскрипция температурасы 50 ℃ дан 60 ℃ ге чейин, температураны жогорулатуу татаал структураларды жана жогорку CG мазмуну калыптарын күчөтүүгө жардам берет;
б.Оптималдуу күйгүзүү температурасы праймердин Tm маанисине негизделиши керек жана Real Time ПТР аспабынын негизинде флуоресценция сигналын чогултуу үчүн эң кыска убакытты тандоо керек.
Эскертүүлөр
Сураныч, ден соолугуңузду жана коопсуздугуңузду камсыз кылуу үчүн керектүү ЖККны, лабораториялык халатты жана кол каптарды кийиңиз!
