Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Description
Cat №: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix – шаблон катары РНКга негизделген мультиплекс сандык ПТР комплекти.Экспериментте тескери транскрипция жана сандык ПТР бир эле реакциялык түтүктө аткарылып, эксперименталдык операцияны жөнөкөйлөтүп, булгануу коркунучун азайтат.Буфердик жана фермент аралашмасынын уникалдуу дизайны бир баскычтуу лиофилизацияланган системада колдонулушу мүмкүн.Комплект сандык күчөтүү үчүн hotstart Taq ДНК Полимеразаны колдонуу менен cDNAнын биринчи тилкесин эффективдүү синтездөө үчүн ысыкка туруктуу Reverse Transscriptase колдонот.Ал оптималдаштырылган реакция буферин, ферменттердин аралашмасын ж.б. камтыйт жана спецификалык эмес ПТР күчөтүүсүнө эффективдүү бөгөт коюучу жана бир нече qPCR реакцияларынын күчөтүү эффективдүүлүгүн жогорулатуучу факторлор кошулуп, праймерлердин күчөтүү эффективдүүлүгүн камсыз кылуу менен бир нече флуоресценттик сандык күчөтүүгө мүмкүндүк берет.
Компоненттер
| аты |
| 1. Lyo-Buffer |
| 2. Лио-энзим аралашмасы |
| 3. Lyo коргоочу |
Транспорт абалыион
A: Lyo-буфер жана коргоочу: -25 ~ -15 ℃, сактоо мөөнөтү 1 жыл.
B: Лио-фермент аралашмасы, 2-8 ℃, сактоо мөөнөтү 6 ай.
иштетүү үчүн нускама
1. Реакция системасы (Мисал катары 25μL алыңыз)
| Компоненттер | Көлөмү (мкл) | Акыркы концентрация |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Лио-энзим аралашмасы | 1 | - |
| Lyo-Protectant | 8 | - |
| Primer Mix (10μM) | 1 | 0.1- 1uM |
| Зонд аралашмасы (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
| РНК шаблону | 5 | - |
| DEPC H2O | 25ке чейин | - |
2. Оптимизацияланган Cycling Protocol
1) Стандарттык Cycling протоколу
| Реакция этабы | Температура | Убакыт | Цикл | |
| 1 | Тескери транскрипция | 50°Ca | 10 мүнөт | 1 |
| 2 | Баштапкы денатурация | 95°C | 5 мүнөт | 1 |
| 3 | Күчөтүү реакциясы | 95°C | 15сек | 45 цикл |
| 60°Cb | 30секc |
2) Fast Cycling Protocol
|
| Реакция этабы | Температура | Убакыт | Цикл |
| 1 | Тескери транскрипция | 50°Ca | 2мин | 1 |
| 2 | Баштапкы денатурация | 95°C | 2сек | 1 |
| 3 | Күчөтүү реакциясы | 95°C | 1сек |
45 цикл |
| 60°Cb | 13секc |
Эскертүү:
a) Тескери транскрипция: Температура 10-15 мүнөткө 42°C же 50°C тандай алат.
b) Күчөтүү реакциясы: Температура долбоорлонгон праймерлердин Tm маанисине ылайык жөнгө салынат.
в)Флуоресценция сигнал алуу: Сураныч, талаптарга ылайык эксперименталдык жол-жобосун орнотуңузаспаптын колдонмосу.
Техникалык маалымат/спецификациялар
| Hot Start | Камтылган ысык баштоо |
| аныктоо ыкмасы | Пример-зондду аныктоо |
| ПЦР ыкмасы | Бир кадам RT-qPCR |
| Үлгү түрү | РНК |
Эскертүүлөр
1. Бул продукт изилдөө үчүн гана колдонулат.
2. Ден соолугуңузду жана коопсуздугуңузду камсыз кылуу үчүн керектүү ЖККны, лабораториялык халат жана кол каптарды кийиңиз!
