Рнасе А
Рибонуклеаза А (RNaseA) — молекулалык салмагы болжол менен 13,7 кДа болгон 4 дисульфиддик байланышты камтыган бир тилкелүү полипептид.RNase A - бул C жана U калдыктарында бир катарлуу РНКны атайын деградациялоочу эндорибонуклеаза.Тактап айтканда, бөлүнүү нуклеотиддин 5′-рибозасы жана жанаша пиримидин нуклеотидинин 3′-рибозасындагы фосфат тобу тарабынан түзүлгөн фосфодиэстер байланышын тааныйт, ошентип 2, 3′-циклдүү фосфаттар тиешелүү 3 ге гидролизденет. ′нуклеозиддик фосфаттар (мисалы, pG-pG-pC-pA-pG pG-pG-pCp жана A-PG генерациялоо үчүн RNase А тарабынан бөлүнөт).RNase A бир катарлуу РНКны ажыратууда эң активдүү.Сунушталган жумушчу концентрациясы 1-100μG / мл, ар кандай реакция системалары менен шайкеш келет.Төмөн туз концентрациясы (0-100 mM NaCl) РНК-ДНК гибриддештирүү жолу менен түзүлгөн бир тилкелүү РНК, эки тилкелүү РНК жана РНК чынжырларын кесүү үчүн колдонулушу мүмкүн.Бирок, туздун жогорку концентрациясында (≥0,3 М), RNase A бир катарлуу РНКны атайын ажыратат.
RNase A көбүнчө плазмиддик ДНКны же геномдук ДНКны даярдоо учурунда РНКны алып салуу үчүн колдонулат. Даярдоо процессинде ДНаза активдүү болобу же жокпу, реакцияга оңой таасир этиши мүмкүн.Суу мончодо кайнатуу салттуу ыкмасы DNase ишин inactivate үчүн колдонсо болот.Бул продукт DNase жана протеазаны камтыбайт жана колдонуудан мурун жылуулук дарылоону талап кылбайт.Мындан тышкары, бул продукт RNase коргоо анализи жана РНК ырааттуулугун анализдөө сыяктуу молекулярдык биология эксперименттеринде да колдонулушу мүмкүн.
Сактоо шарттары
Продукцияны -25～-15℃ температурада сактоого болот, 2 жыл жарактуу.
Instructions
Бул RNase A сактоо чечим даярдоо үчүн жалпы ыкмаларынын бири болуп саналат.Аны да даярдаса болотлабораториялык же маалымдама адабияттардагы салттуу методдорго ылайык башка ыкмалар (мисалы10 мМ Tris-HCl, pH 7,5 же Tris-NaCl эритмесинде түздөн-түз эрийт)
1. 10 мг/мл RNase A сактоочу эритмесин даярдоо үчүн 10 мм натрий ацетатын (рН 5,2) колдонуңуз
2. 15 мүнөт 100 ℃ жылытуу
3. Бөлмө температурасына чейин муздатып, 1/10 көлөмүндө 1 М Tris-HCl (рН 7,4) кошуп, анын pH деңгээлин 7,4кө тууралаңыз (үчүнмисалы, 500 мл 10г/мл RNase сактоо эритмеси 1M Tris-HCL, PH7.4 кошуу)
4. 2 жылга чейин туруктуу болушу мүмкүн тоңдурулган сактоо үчүн -20 ℃ боюнча суб-пакеттелген.
[Эскертүүлөр]: нейтралдуу шарттарда RNaseA эритмеси кайнаганда, RNase чөкмөлөрү пайда болот;Аны азыраак рН менен кайнатыңыз, эгерде жаан-чачындар болсо, анда белок аралашмаларынын болушу менен шартталган болушу мүмкүн.Эгерде чөкмө кайнагандан кийин табылса, аралашмаларды жогорку ылдамдыктагы центрифугалоо (13000 айн/мин) жолу менен алып салууга болот, андан кийин тоңдурулган сактоо үчүн суб-пакеткага салынышы мүмкүн.
Продукт маалыматы
| Синонимдер | Рибонуклеаза I;панкреатикалык рибонуклеаза;Рибонуклеаза 3'-пиримидноолигонуклеотидоидролаза;Rnase A;Endoribonulcease I |
| CAS № | 9001-99-4 |
| Көрүнүш | Ак лиофилизацияланган порошок |
| Молекулярдык салмак | ~ 13.7kDa (аминокислота ырааттуулугу) |
| Ph Value | 7.6 (иш аралыгы 6-10) |
| Ылайыктуу температура | 60℃ (Аракет диапазону 15-70℃) |
| Активдештируучу агент | Na2+.К+ |
| Ингибитор | Rnase ингибитору |
| Инактивация ыкмасы | Жылытуу менен активдештирүүгө болбойт, центрифуга колонкасын колдонуу сунушталат |
| Origin | Bovine |
| Эригичтик | Сууда эрийт (10мг/мл) |
| Кургак боюнча жоготуу | ≤5,0% |
| Ферменттик активдүүлүк | ≥60 Куниц бирдиги/мг |
| Изоэлектрдик чекит | 9.6 |
Эскертүүлөр
Сиздин коопсуздугуңуз жана ден соолугуңуз үчүн лабораториялык халаттарды жана операция үчүн бир жолу колдонулуучу кол каптарды кийиңиз.
