Hotstart Taq ДНК Полимераза (5u/ul)
Taq ДНК Полимераза - бул кош антителолор менен кош блокировкалоочу ДНК полимеразасы ысык башталгыч.Денатурацияга чейинки температурада 30 секунда ысытуу антителону толугу менен активдештирбей, ДНК полимераза активдүүлүгүн жана экзонуклеаза активдүүлүгүн бошотушу мүмкүн.Кош бөгөттөө өзгөчөлүгү дал келбегендиктен же праймер димеринен келип чыккан спецификалык эмес күчөтүүнү натыйжалуу болтурбастан, ошондой эле in vitro аныктоо реагентинин ташуу же бөлмөдө колдонуу учурунда туруктуураак болушу үчүн, зонддун деградациясынан улам пайда болгон флуоресценттик сигналдын төмөндөшүнө натыйжалуу тоскоол болот. температура.
Компоненттер
| Компонент | HC1012B (250U) | HC1012B (1000U) | HC1012B (10000U) | HC1012B (25000U) |
| Так ДНК полимераза(5 U/мкл) | 50 мкл | 200 мкл | 2 мл | 5 мл |
Сактоо абалы
Продукт кургак муз менен жөнөтүлөт жана -25°C~-15°C температурада 2 жыл сакталат.
Техникалык шарттар
| Полимераз | Так ДНК полимераза |
| Тазалык | ≥ 95% (SDS-PAGE) |
| Hot Start | Камтылган Hot Start |
| Реакция ылдамдыгы | Стандарт |
| Экзонуклеазанын активдүүлүгү | 5′→3′ |
Instructions
Reaction Setup
| Компоненттер | Көлөмү (мкл) | Акыркы концентрация |
| 2× буферa | 25 | 1× |
| Праймер/Зонд аралашмасыб | × | 0,1 мкмоль/л-0,5 мкмоль/л |
| Hotstart Taq Polymerase (5U/мкл) | 1.2 | 0,12 U/мкл |
| ДНК шаблонуc | × | 0,1-100 нг |
| ddH2O | 50гө чейин | - |
Эскертүүлөр:
1) Конкреттүү эксперименттик колдонууга ылайык, тиешелүү реакция буферин даярдоо керек.
2) ДНКнын көлөмү жана зонддордун же праймерлердин концентрациясы сунушталган концентрациялар.Оптималдуу концентрация конкреттүү эксперименталдык шарттарга ылайык жөнгө салынышы мүмкүн.
Термикалык цикл протоколу
| Кадам | Температура(°C) | Убакыт | Циклдер |
| Алдын ала денатурация | 95 ℃ | 5мин | 1 |
| Денатурация | 95 ℃ | 15 сек | 45 |
| Күйүү / узартуу | 60 ℃а | 30 секb |
Эскертүүлөр:
1) Реакциянын температурасы долбоорлонгон праймерлердин Tm маанисине ылайык жөнгө салынат.
2) Ар кандай qPCR инструменттери ар кандай флуоресценттик сигналды алуу убактысын талап кылат, эң кыска убакыт чегине ылайык орнотуңуз.
Эскертүүлөр
Сураныч, ден соолугуңузду жана коопсуздугуңузду камсыз кылуу үчүн керектүү ЖККны, лабораториялык халатты жана кол каптарды кийиңиз!
