One Step RT-qPCR SYBR Green Premix
Cat №: HCB5140A
One Step RT-qPCR Syber Green Premix SYBR Green I боёгунун негизинде флуоресценттик сандык аныктоо үчүн.Гене-спецификалык праймерлерди колдонуу менен, тескери транскрипция жана qPCR реакциялары бир түтүктө бүткөрүлүп, капкактарды кайра-кайра ачуу жана пиптинг операцияларына муктаждыкты жок кылат, анализдин натыйжалуулугун бир топ жакшыртат жана булгануу коркунучун азайтат.РНК үлгүлөрү үчүн комплект эффективдүү cDNA синтези үчүн ысыкка туруктуу Reverse Transscriptase жана сандык күчөтүү үчүн HotStart Taq ДНК Полимеразасын колдонот.Оптимизацияланган буфердик тутумдун алкагында комплекттин сезгичтиги жогорку деңгээлдеги максаттар үчүн 0,1 пг жана орточо деңгээлдеги максаттар үчүн 1 пг чейин болушу мүмкүн.Комплект ДНК үлгүлөрүн көбөйтүү жана сандык аныктоо үчүн ылайыктуу.Бул ар кандай өсүмдүктөрдүн жана жаныбарлардын үлгүлөрүнүн, клеткалардын жана микроорганизмдердин нуклеиндик кислоталарын сезгич аныктоого жана сандык аныктоого мүмкүндүк берет.
Компоненттер
| No | аты | Көлөм | Көлөм |
| 1 | Өркүндөтүлгөн буфер | 250 мкл | 2×1,25 мл |
| 2 | Advanced Enzyme Mix | 20 мкл | 200 мкл |
| 3 | RNase Free H2O | 250 мкл | 2×1,25 мл |
Сактоо шарттары
Бул продукт -25 ~ -15 ℃ жарыктан алыс жерде 1 жыл сакталышы керек.
Instructions
1.Reaction системасынын конфигурациясыd
| Компоненттер | Көлөмү (мкл) | Көлөмү (мкл) | Акыркы концентрация |
| Өркүндөтүлгөн буфер | 12.5 | 25 | 1× |
| Advanced Enzyme Mix | 1 | 2 | - |
| Алдыга праймер (10 мкмоль/л)a | 0.5 | 1 | 0,2 мкмоль/л |
| Тескери праймер (10 мкмоль/л)a | 0.5 | 1 | 0,2 мкмоль/л |
| RNA Tamplateb | X | X | - |
| RNase Free H2Оc | 25ке чейин | 50гө чейин | - |
Эскертүүлөр:
1) а.Тал акыркы праймердин концентрациясы 0,2 мкмоль/л болгон, аны да тийиштүү түрдө 0,1 жана 1 мкмоль/л ортосунда жөнгө салууга болот.
2) б.Реагент өтө сезгич, Жалпы РНК 1pg-1μg диапазонунда жана адам үлгүлөрүн текшерүү оптималдуу киргизүүнү көрсөттү 1 pg-100 нг, тийиштүү түрдө 15-30 диапазонундагы жалпы Ct маанисин көзөмөлдөйт.
3) в.Максаттуу генди күчөтүүнүн жарактуулугун жана кайталанышын камсыз кылуу үчүн 20μL же 50μL колдонуу сунушталат.
4) г.Өтө таза отургучта даярданыңыз жана нуклеаза калдыктары жок учтар менен реакция түтүктөрүн колдонуңуз;чыпкалуу картридждер менен кеңештер сунушталат.Кайчылаш булгануудан жана аэрозолдук булгануудан сактаныңыз.
2.Реакция программасы
| Цикл кадамы | Темп. | Убакыт | Циклдер |
| Тескери транскрипция | 50℃a | 6мин | 1 |
| Баштапкы денатурация | 95℃ | 5мин | 1 |
| Күчөтүү реакциясы | 95℃ | 15 сек | 40 |
| 60℃b | 30 сек | ||
| Эрүү ийри баскычы | Инструменттин демейки параметрлери | 1 | |
Эскертүүлөр:
1) а.Тескери транскрипция температурасы эксперименталдык муктаждыктарга ылайык 50-55°C арасында тандалышы мүмкүн.ДНК үлгүлөрү үчүн, тескери транскрипция процессин өткөрүп жиберүүгө болот.
2) б.Өзгөчө учурларда күйгүзүү/узартуу температурасы праймердин Tm маанисине ылайык жөнгө салынышы мүмкүн, 60°C сунушталат.
Эскертүүлөр
1. Бул продукт изилдөө үчүн гана колдонулат.
2. Коопсуздугуңуз үчүн лабораториялык халат жана бир жолу колдонулуучу кол каптар менен иштеңиз.
