Ultra Nuclease GMP-класс
Cat №: HC2016A
UltraNuclease GMP-классы генетикалык жактан иштелип чыккан жана GMP чөйрөлөрүндө даярдалган ичеги таякчасында (E.coli) туюнтулуп, тазаланат.Бул илимий изилдөөдө клетканын супернатантынын жана клетка лизатынын илешкектүүлүгүн төмөндөтөт, белок тазалоонун натыйжалуулугун жогорулатат жана белоктун функционалдуу изилдөөлөрүн күчөтөт.Продукт ошондой эле кабыл алуучу нуклеин кислотасынын калдыктарын pg даражасына чейин азайтып, биологиялык өнүмдөрдүн иштешин жана коопсуздугун, анын ичинде вирустарды тазалоону, вакциналарды өндүрүүнү жана белок/полисахаридди фармацевтикалык өндүрүштү жакшыртат.Мындан тышкары, продукт ошондой эле клетка терапиясы жана вакцина иштеп чыгууда адамдын перифериялык кан мононуклеардык клеткаларынын (PBMC) топтолушуна жол бербөө үчүн колдонулушу мүмкүн.
UltraNuclease стерилденген реагент түрүндө берилет, буферде (20мМ Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20mM NaCl, 50% глицерин) элюталанган, түссүз, тунук суюктуктун көрүнүшү менен.Бул продукт GMP процессинин талаптары менен өндүрүлгөн жана суюк формада берилген.
Компоненттер
UltraNuclease GMP-класс (250 U/мкл)
Сактоо шарттары
Продукт кургак муз менен жеткирилет жана -25℃~-15°Cде эки жыл сакталат.
Эгерде продукт ачылып, 4℃ температурада бир жумадан ашык сакталса, чыпкалоону сунуштайбызпродукт микробдук булганышын алдын алуу үчүн.
Техникалык шарттар
| Expression Host | UltraNuclease гени менен рекомбинант E. coli |
| Молекулярдык Салмак | 26,5 кДа |
| электрдик чекит | 6.85 |
| Тазалык | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Сактоочу буфер | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20mM NaCl, 50% глицерин |
|
Бирдиктин аныктамасы | Бир активдүүлүк бирдигинин аныктамасы (U) - бул колдонулган ферменттин көлөмүΔA260 сиңирүү маанисин 30 мүнөт ичинде 1,0 га 2. 625 мл өзгөртүүрН 8,0 менен 37℃ реакция системасы (толук сиңирүүгө барабар)37 мкг лосось сперма ДНКсын олигонуклеотиддерге). |
Instructions
1. Үлгү Коллекция
Жабышкан клеткалар: чөйрөнү алып салуу, PBS менен клеткаларды жууп, супернатантты алып салуу.
Асма клеткалар: центрифугалоо жолу менен клеткаларды чогултуу, PBS менен клеткаларды жуу, 6000 центрифуга10 мүнөт айн, гранул чогултуу.
Escherichia coli: центрифугалоо жолу менен бактерияларды чогултуу, PBS менен бир жолу жуу, 8000 центрифугалоо5 мүнөт айн/мин, жана гранул чогултуу.
2. Үлгү менен дарылоо
Чогулган клетка гранулдарын массанын(г) көлөмүнүн(мл)1:(10-20) катышында лизис буфери менен же музда же бөлмө температурасында механикалык же химиялык ыкмалар менен (1 г клетка грануласында болжол менен
109 клетка).
3. Ферменттик дарылоо
Реакция системасына 1-5мМ MgCl кошуп, рНды 8-9га тууралаңыз.
1 г клетка гранулдарын сиңирүү үчүн 250 бирдик катышына ылайык UltraNuclease кошуп, 37℃ температурада 30 мүнөттөн ашык инкубациялаңыз.Сураныч, тандоо үчүн "Сунушталган реакция убактысы" формасын караңыздарылоонун узактыгы.
4. Супернатант Коллекция
12000 айн/мин ылдамдыкта 30 мүнөт центрифугалап, үстүнкү затты чогултуңуз.
Эскертүү: Эгерде эритме кислоталуу же щелочтуу болсо, же туздун жогорку концентрациясын камтыса, жуучу каражаттар жеденатуранттар, сураныч, ферменттин дозасын көбөйтүңүз же ошого жараша дарылоо убактысын узартыңыз.
Сунушталган реакция шарттарыон
| Параметр | Оптималдуу шарт | Натыйжалуу кондиционер |
| Mg²+Концентрация | 1-5 мм | 1-10 мМ |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Температура | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT концентрациясы | 0-100 мМ | >0 мм |
| Меркаптоэтанол концентрациясы | 0-100 мМ | >0 мм |
| Моноваленттүү катион концентрациясы | 0-20 мМ | 0-150 мМ |
| Фосфат лондун концентрациясы | 0-10 мМ | 0-100 мМ |
Сунушталган Реакция Убакыт (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Ультрануклеазанын суммасы (акыркы концентрация) | Реакция убактысы |
| 0,25 U/мл | >10 ч |
| 2,5 U/мл | >4с |
| 25 U/мл | 30 мүнөт |
Эскертүүлөр:
Сураныч, ден соолугуңузду жана коопсуздугуңузду камсыз кылуу үчүн керектүү ЖККны, лабораториялык халатты жана кол каптарды кийиңиз!
